O soupravě pro stanovení laktátdehydrogenázy

Sada pro stanovení laktátdehydrogenázy (LDH) poskytuje vysoce citlivou a rychlou metodu měření aktivity LDH. Enzym reaguje se specifickou sondou za vzniku barvy. Soupravy LDH Activity Assay Kit mohou detekovat hladiny od jedné do sto mU/ml. Vyplnění testu trvá méně než 30 minut. Jsou také vhodné pro vysoce výkonné analýzy.

Laktátdehydrogenáza (LDH) je rozpustný cytosolový enzym

LDH je cytosolový enzym, který v těle katalyzuje syntézu laktátu a pyruvátu. Jeho koncentrace v těle mohou ukazovat na poškození buněk a běžně se používají jako biomarkery. Aktivita LDH byla nejvyšší v EDL, následovala bránice a nejnižší v SOL. V séru bylo pět různých izoenzymů a každý sval obsahoval specifický vzorec izoenzymů LDH. EDL byl nejhojnější, obsahoval vysoký podíl LDH-5, zatímco bránice měla nejnižší aktivitu.

LDH se uvolňuje z buněk, když je narušena integrita plazmatické membrány. Naproti tomu apoptóza zahrnuje kloubový rozpad buňky na apoptotická tělíska vázaná na membránu. Tento enzym je také obecným měřítkem permeability plazmatické membrány. LDH-Glo(tm) Cytotoxicity Assay poskytuje jednoduchou bioluminiscenční metodu kvantifikace hladin LDH ve vzorcích s nízkým počtem buněk, jako jsou 3D mikrotkáňové sféroidy, primární buňky a kmenové buňky.

Aktivita LDH je ovlivněna pH. V tomto experimentu byla měřena aktivita LDH v médiu GTSF-2 (pH 7,4-7,2) a chybové úsečky představují standardní chyby. Pro n = 4 buňky byly signifikantní rozdíly stanoveny Wilcoxonovým znaménkovým rank testem nebo jednovzorkovým t-testem. Jakmile je rovnováha pH opravena, aktivita LDH se v buňkách zvýší a hladina buněčné glukózy se sníží.

Je to spolehlivý indikátor životaschopnosti buněk

Počet životaschopných buněk ve vzorku je indikátorem životaschopnosti buněk. Životaschopnost buněk hraje klíčovou roli ve všech formách buněčné kultury. Testy životaschopnosti buněk se také používají ke korelaci chování buněk s počtem životaschopných buněk. Testy buněčné životaschopnosti jsou populární ve farmaceutickém průmyslu, kde výzkumníci používají různé metody pro screening terapeutik na různé nemoci. Mnoho vyvinutých terapeutik se zaměřuje na rakovinné buňky.

Tato testovací souprava se snadno používá, je levná a nabízí reprodukovatelné výsledky. Odstraňuje potřebu ruční přípravy a je vhodný pro 96 a 384jamkové destičky. Testovací souprava obsahuje všechna potřebná činidla, včetně 96jamkové destičky. Sada také obsahuje protokol, který obsahuje podrobné pokyny. Průtoková cytometrie je vynikající volbou pro stanovení životaschopnosti buněk v laboratoři.

Sada Alamar blue cell viability kit je dostupná od Bio-Rad a Thermo Fisher Scientific. K dispozici je také test životaschopnosti modrých buněk G-Biosciences Alamar a test Cell-Quant AlamarBlue. Pomocí této sady můžete také zkontrolovat životaschopnost kryokonzervovaných buněk. Před rozmrazováním kryokonzervovaných buněk byste měli zvážit typ buněk. Je také důležité použít vhodné testovací činidlo pro velikost buněk.

Je testován a ověřen

Lékaři neztrácejí význam validace diagnostického testu. Validace znamená rozhodování založené na konkrétní interpretaci dat z hodnocení. Diagnostické testy jsou cenné pouze tehdy, když ovlivňují rozhodnutí a pokud test vede ke smysluplným změnám v managementu pacienta. Lékaři jsou učeni, aby se vyhýbali objednávání testů, které nemění řízení. Ukázkovým příkladem validace testu je PSA test, který je vysoce spolehlivý a úzce souvisí s diagnózou rakoviny prostaty.