ADA Princip sady pro stanovení adenosindeaminázy (metoda glutamátdehydrogenázy)

V oblasti moderní lékařské diagnostiky hraje měření biochemických ukazatelů zásadní roli v diagnostice, léčbě a hodnocení prognózy onemocnění. Mezi nimi adenosindeaminázu (ADA), jako důležitý enzymový marker hraje nepostradatelnou roli v diagnostice různých onemocnění. ADA se obvykle měří pomocí specifické soupravy. Zde podrobně představíme princip soupravy ADA Adenosine Deaminase Assay Kit založené na metodě glutamát dehydrogenázy.

1. Fyziologický význam ADA
ADA je enzym široce přítomný v různých tkáních lidského těla, zejména v lymfocytech. Účastní se především metabolického procesu adenosinu, přeměňuje adenosin na inosin a amoniak. Za normálních fyziologických podmínek zůstává aktivita ADA na relativně stabilní úrovni. Když se však v lidském těle objeví určitá onemocnění, aktivita ADA se změní. Například u onemocnění, jako je tuberkulózní zánět pohrudnice, hepatitida a cirhóza, se aktivita ADA výrazně zvýší.

2. Princip soupravy pro stanovení ADA
Princip testovací soupravy ADA (metoda dehydrogenázy kyseliny glutamové) je založen na tom, že ADA katalyzuje deaminaci adenosinu za vzniku inosinu a amoniaku a poté pomocí glutamátdehydrogenázy převede amoniak na glutamát a současně produkuje NADH. NADH má charakteristickou absorbanci při vlnové délce 340nm. Měřením změny absorbance lze nepřímo vypočítat aktivitu ADA.
Konkrétně kit obsahuje reakční substrát adenosin, koenzym NADH, glutamátdehydrogenázu a další potřebné reagencie. Během reakce ADA katalyzuje deaminaci adenosinu za vzniku amoniaku, který reaguje s α-ketoglutarátem působením glutamátdehydrogenázy za vzniku glutamátu, přičemž spotřebovává NADH. Měřením změny absorbance NADH před a po reakci lze vypočítat aktivitu ADA.

Souprava pro stanovení ADA (metoda dehydrogenázy kyseliny glutamové) je citlivá, přesná a pohodlná metoda stanovení ADA. Je založen na principu, že ADA katalyzuje deaminaci adenosinu za vzniku amoniaku a vypočítává aktivitu ADA měřením změny absorbance NADH. Tato souprava má široké uplatnění v klinické medicíně a má velký význam pro zlepšení diagnostické přesnosti onemocnění, vedení léčby a hodnocení prognózy.